ОБОБЩЕНИЕ И ОБЯСНЕНИЕ НА ТЕСТА
Маларията е хемолитично, фебрилно заболяване, пренасяно от комари, което заразява над 200 милиона души и убива повече от 1 милион души годишно.Причинява се от четири вида Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale и P. malariae.Всички тези плазмодии заразяват и унищожават човешките еритроцити, предизвиквайки втрисане, треска, анемия и спленомегалия.P. falciparum причинява по-сериозно заболяване от другите видове плазмодии и е причина за повечето смъртни случаи от малария и е един от двата най-разпространени патогена на малария.
Традиционно маларията се диагностицира чрез демонстриране на микроорганизмите върху оцветени по Гимза дебели петна от периферна кръв, а различните видове плазмодий се отличават по появата си в заразените еритроцити.Техниката е в състояние да постави точна и надеждна диагноза, но само когато се извършва от квалифицирани микроскописти, използващи определени протоколи, което представлява големи пречки за отдалечените и бедни райони на света.
Бързият тест Pf Ag е разработен за разрешаване на тези пречки.Той открива Pf специфичния антиген pHRP-II в проба от човешка кръв.Може да се извършва от необучен или минимално квалифициран персонал, без лабораторно оборудване.
ПРИНЦИП
Pf Ag Rapid Test е хроматографски имуноанализ със страничен поток.Компонентите на тестовата лента се състоят от: 1) конюгирана подложка с цвят на бордо, съдържаща моноклонално анти-PHRP-II антитяло, конюгирано с колоидно злато (pHRP II-златни конюгати), 2) нитроцелулозна мембранна лента, съдържаща тестова лента (Pf) и контролна лента (C лента).Pf лентата е предварително покрита с поликлонални анти-pHRP-II антитела, а C лентата е предварително покрита с кози анти-миши IgG.
По време на анализа адекватен обем от кръвната проба се разпределя в ямката за проба (S) на тестовата касета, като към буферната ямка (B) се добавя лизисен буфер.Буферът съдържа детергент, който лизира червените кръвни клетки и освобождава pHRPII антигена, който мигрира чрез капилярно действие през лентата, държана в касетата.pHRP-II, ако присъства в пробата, ще се свърже с конюгатите pHRP II-злато.След това имунокомплексът се улавя върху мембраната от предварително покрити поликлонални антитела antipHRP II, образувайки виненочервена Pf лента, което показва Pf положителен резултат от теста.
Отсъствието на Pf лента предполага отрицателен резултат.Тестът съдържа вътрешна контрола (C лента), която трябва да показва виненочервена лента на имунокомплекса на кози анти-миши IgG / миши IgG (pHRP II–златни конюгати), независимо от развитието на цвета на някоя от Pf лентите.В противен случай резултатът от теста е невалиден и пробата трябва да се тества отново с друго устройство.