ОБОБЩЕНИЕ И ОБЯСНЕНИЕ НА ТЕСТА
Маларията е хемолитично, фебрилно заболяване, пренасяно от комари, което заразява над 200 милиона души и убива повече от 1 милион души годишно.Причинява се от четири вида Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale и P. malariae.Всички тези плазмодии заразяват и унищожават човешките еритроцити, предизвиквайки втрисане, треска, анемия и спленомегалия.P. falciparum причинява по-сериозно заболяване от другите видове плазмодии и е причина за повечето смъртни случаи от малария.P. falciparum и P. vivax са най-често срещаните патогени, но има значителни географски различия в разпространението на видовете.
Традиционно маларията се диагностицира чрез демонстриране на микроорганизмите върху оцветени с Гимза дебели натривки от периферна кръв, а различните видове плазмодий се отличават по появата си в заразените еритроцити1.Техниката е способна за точна и надеждна диагностика, но само когато се извършва от квалифицирани микроскописти, използващи определени протоколи2, което представлява големи пречки за отдалечените и бедни райони на света.
Комплектът за бърз тест за Pf/Pan антиген на малария е разработен за разрешаване на тези пречки.Тестът използва двойка моноклонални и поликлонални антитела към специфичен протеин на P. falciparum, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) и двойка моноклонални антитела към плазмодиев лактат дехидрогеназа (pLDH), протеин, произведен от четирите вида плазмодий, като по този начин позволява едновременно откриване и диференциране на инфекцията с P. falciparum и или някой от другите три плазмодия.Може да се извършва от необучен или минимално квалифициран персонал, без лабораторно оборудване.
ПРИНЦИП
Комплектът Pf/ Pan Malaria Rapid Test е хроматографски имуноанализ със страничен поток.Компонентите на тест лентата се състоят от: 1) конюгирана подложка с цвят на бордо, съдържаща мише анти-PHRP-II антитяло, конюгирано с колоидно злато (pHRP II-златни конюгати) и мише анти-pLDH антитяло, конюгирано с колоидно злато (pLDH-златни конюгати),
2) нитроцелулозна мембранна лента, съдържаща две тестови ленти (Pan и Pv ленти) и контролна лента (C лента).Пан лентата е предварително покрита с моноклонално анти-pLDH антитяло, чрез което може да бъде открита инфекцията с всеки от четирите вида плазмодии, Pf лентата е предварително покрита с поликлонални анти-pHRP-II антитела за откриване на Pf инфекция, а С лентата е покрита с кози анти-миши IgG.
По време на анализа адекватен обем от кръвната проба се разпределя в ямката за проба (S) на тестовата касета, като към буферната ямка (B) се добавя лизисен буфер.Буферът съдържа детергент, който лизира червените кръвни клетки и освобождава различни антигени на плазмодия, които мигрират чрез капилярно действие през лентата, държана в касетата.pHRP-II, ако присъства в пробата, ще се свърже с конюгатите pHRP II-злато.След това имунокомплексът се улавя върху мембраната от предварително покрити анти-pHRPII антитела, образувайки виненочервена Pf лента, което показва Pf положителен резултат от теста.pLDH, ако присъства в пробата, ще се свърже с pLDH златните конюгати.След това имунокомплексът се улавя върху мембраната от предварително покритото анти pLDH антитяло, образувайки виненочервена Pan лента, което показва положителен резултат от теста за плазмодий.При отсъствие на Пан лента може да се препоръча положителен резултат от теста за всеки от другите три плазмодия.
Липсата на тестови ленти (Pan и Pf) предполага отрицателен резултат.Тестът съдържа вътрешна контрола (C лента), която трябва да показва виненочервена лента на имунокомплекса на кози анти-миши IgG / миши IgG (pHRP-II и pLDH-златни конюгати), независимо от развитието на цвета на която и да е от тестовите ленти.В противен случай резултатът от теста е невалиден и пробата трябва да се тества отново с друго устройство.
